訂購信息：
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目錄號 |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
售價(jià) |
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X11497 |
Alkaline Phosphatase from E.Coli 堿性磷酸酶，來自大腸桿菌 |
10mg |
￥1,000.00 |
特性說明：
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CAS號 |
9001-78-9 |
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純化方式 |
鹽分餾 |
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外觀 |
2.5M硫酸銨懸液，PH 8.0 |
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抑制劑 |
螯合劑和無機(jī)磷酸鹽 |
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最佳PH |
8.0 |
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比活力 |
≥10 units/mg protein (25℃，PH8.0) |
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活性單位定義 |
25℃，ph8.0反應(yīng)條件下，每min內(nèi)水解pNPP生成1μmol對硝基苯酚所需的酶量定義為1個(gè)unit |
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運(yùn)輸條件 |
冰袋運(yùn)輸 |
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儲存條件 |
2-8°C保存,有效期1年 |
產(chǎn)品描述：
堿性磷酸酶(Phosphatase, Alkaline, ALP，EC3.13.1) ，是一種含兩個(gè)相同亞基的二聚體，也是一種約含12%碳水化合物(6%己糖和6%其他中性糖)的糖蛋白，每個(gè)ALP分子含4個(gè)鋅離子和4個(gè)二硫鍵。鎂離子存在情況下，ALP可達(dá)到最高酶活。AP能催化磷酸單酯水解，比如對硝基苯酚磷酸鹽(pNPP) 、 磷酸苯酯、酚酞磷酸、α-甘油磷酸、β-甘油磷酸、2-磷酸甘油酸、磷酸丙糖、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-1-磷酸、果糖-6-磷酸、腺苷-5-磷酸、腺苷-3-磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸和β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等。
堿性磷酸酶(ALP)常用來偶聯(lián)抗體和其他蛋白，從而滿足ELISA、WB和組織化學(xué)檢測上的應(yīng)用。通常用來蛋白的去磷酸化實(shí)驗(yàn)，比如酪蛋白和核酸等。當(dāng)需要高檢測靈敏度時(shí)也能用來蛋白標(biāo)記。還可用在DNA或RNA的5,-末端去磷酸以防止自連。經(jīng)堿性磷酸酶的去磷酸化作用后，DNA或RNA還可被放射性標(biāo)記磷酸鹽標(biāo)記(通過T4多核苷酸激酶)。
純化酶產(chǎn)品(硫酸銨懸浮液形式)使用方法
1 當(dāng)硫酸銨可能會干擾酶反應(yīng)，操作如下:
1.1從冰箱內(nèi)取出酶。[注: 硫酸銨懸浮液產(chǎn)品不可凍存! ! ]
1.2確保蓋子擰緊，然后顛倒混勻數(shù)次得到乳白色懸浮液，此過程可能需要一分鐘左右。 不可渦旋或超聲，因如此強(qiáng)烈的處理可能會引|起某些酶的變性。
1.3使用寬口槍頭，吸取一部分懸浮液轉(zhuǎn)移到一干凈的離心管內(nèi)。
1.4約10,000~15,000x g離心10min.若是條件允許，低溫(2-8℃) 設(shè)置下離心。.
1.5小心吸取盡可能透明的上清液，并保留到干凈的離心管內(nèi)。沒有必要完全吸掉所有的硫酸銨溶液。
1.6用適量的反應(yīng)緩沖液加入沉淀中并使其溶解。
1.7對上述得到的上清液，以及用反應(yīng)緩沖液溶解的酶溶液進(jìn)行蛋白含量和/或酶活力檢測。
2 當(dāng)硫酸銨不會干擾酶反應(yīng)，操作如下:
2.1從冰箱內(nèi)取出酶。[注: 硫酸鈹縣浮液產(chǎn)品不可凍存! ! ]
2.2確保蓋子擰緊，然后顛倒混勻數(shù)次得到乳白色懸浮液。此過程可能需要一分鐘左右。 不可渦旋或超聲，因如此強(qiáng)烈的處理可能會引起某些酶的變性。
2.3使用寬口槍頭，吸取一部分層浮液直接加入反應(yīng)緩中液中即可。
[注意:對于硫酸銨懸浮液,絕大部分的酶都是以固體形式存在。很有可能僅僅可忽略量的酶以溶于硫酸銨溶液的形式存在。]
注意事項(xiàng)：
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一 次性手套操作。
本產(chǎn)品僅供科研使用，不可用于臨床診斷應(yīng)用或其他用途。
